期刊简介
《微生物学免疫学进展》杂志是由中华人民共和国新闻出版总署、正式批准公开发行的优秀期刊，微生物学免疫学进展杂志具有正规的双刊号，其中国内统一刊号：CN62-1120/R，国际刊号：ISSN1005-5673。微生物学免疫学进展杂志社由中华人民共和国卫生部主管、主办，本刊为刊。自创刊以来，被公认誉为具有业内影响力的杂志之一。微生物学免疫学进展并获中国优秀期刊奖，现中国期刊网数据库全文收录期刊。
《微生物学免疫学进展》办刊宗旨为推动医学科技进步，交流经验，培养人才，为卫生防疫、临床医学、生物制品研制提供最新科技信息。
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- 杂志名称：微生物学免疫学进展杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华预防医学会 兰州生物制品研究所
- 国际刊号：1005-5673
- 国内刊号：62-1120/R
- 出版周期：
期刊荣誉：中国核心期刊遴选数据库期刊收录：
铜绿假单胞菌LasR蛋白的表达及抗血清制备
訾静；王军；高磊；张琨；张绪；万一
关键词：铜绿假单胞菌, LasR, 原核表达, 抗血清
摘要：目的 将铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)中的调控蛋白LasR在原核系统中进行表达,制备LasR抗血清,为PA中las调控系统的研究奠定基础.方法 以PA模式菌株PAO1全基因组为模板,PCR扩增lasR基因,PCR产物用BamHI/EcoRI双酶切连接至pGEX-4T-1载体,获得重组表达载体pGEX-4T-1-lasR;PCR产物经NcoI/XhoI双酶切连接至pET28a载体,获得重组表达载体pET28a-lasR.将重组表达载体分别转化至大肠杆菌感受态细胞BL21中,分别以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达GST-LasR和His-LasR蛋白,通过GST或Ni2+亲和层析纯化重组蛋白.将纯化后的His-LasR蛋白免疫新西兰大白兔,制备LasR抗血清;纯化后的GST-LasR蛋白用于LasR抗血清ELISA效价的检测.结果 lasR基因序列大小为717 bp;成功构建pGEX-4T-1-lasR和pET28a-lasR表达载体.构建的工程菌能够有效表达目的蛋白His-LasR和GST-LasR,蛋白纯度大于95％;LasR抗血清的效价为1∶60 000.结论 在原核系统中成功表达了可溶性LasR重组蛋白,并获得高效价的LasR抗血清,为PA中las调控系统的研究奠定了基础.
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