期刊简介
《微生物学免疫学进展》杂志是由中华人民共和国新闻出版总署、正式批准公开发行的优秀期刊，微生物学免疫学进展杂志具有正规的双刊号，其中国内统一刊号：CN62-1120/R，国际刊号：ISSN1005-5673。微生物学免疫学进展杂志社由中华人民共和国卫生部主管、主办，本刊为刊。自创刊以来，被公认誉为具有业内影响力的杂志之一。微生物学免疫学进展并获中国优秀期刊奖，现中国期刊网数据库全文收录期刊。
《微生物学免疫学进展》办刊宗旨为推动医学科技进步，交流经验，培养人才，为卫生防疫、临床医学、生物制品研制提供最新科技信息。
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- 杂志名称：微生物学免疫学进展杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华预防医学会 兰州生物制品研究所
- 国际刊号：1005-5673
- 国内刊号：62-1120/R
- 出版周期：
期刊荣誉：中国核心期刊遴选数据库期刊收录：
EV71-2A突变质粒的构建及体内外功能初探
原素梅；徐超；张煦；王源；谢冰玉；熊庆；彭宜红
关键词：肠道病毒71型, 突变质粒, 构建, 序列分析, 生物学效应
摘要：目的：构建pcDNA3.1-EV71-2A的突变质粒(EV71-2Amut),并对其功能进行检测,为进一步研究肠道病毒71型(Enterovirus type 71,EV71)2A蛋白酶的活性位点及其生物学功能奠定实验基础。方法利用聚合酶链式反应(PCR)定点诱变技术,定点突变编码EV71-2A第21His、39Asp 和110Cys 氨基酸的位点,构建EV71-2Amut,并测序鉴定。将所构建突变质粒与巨细胞病毒( Cytomegalovirus,CMV)启动子介导的真核细胞荧光素酶报告基因( pRL-CMV)共转染人横纹肌肉瘤细胞( RD细胞),通过观察转染组的EV71-2Apro 和EV71-2Amut 对pRL-CMV荧光强度的影响,判断突变质粒的细胞内酶活性。将EV71-2Apro 或EV71-2Amut 质粒转染BALB/c小鼠股四头肌,用RT-PCR检测局部相应质粒的mRNA水平,并观察局部肌肉组织的病理变化。结果构建的突变质粒EV71-2Amut 经测序及比对,结果与预计突变位点一致；在细胞学水平检测到的pRL-CMV荧光强度,EV71-2Amut 组比EV71-2Apro 组显著增高( P<0.05)；小鼠股四头肌注射局部均检出 EV71-2Apro 和 EV71-2Amut 的 mRNA 表达,且与 EV71-2Apro 组相比,EV71-2Amut 注射组的肌肉组织的肌肉凝固性坏死、炎症反应病理损伤较轻。结论成功构建了突变的EV71-2Amut 质粒,为研究EV71-2A蛋白酶的生物学功能奠定了实验基础。
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