期刊简介
《微生物学免疫学进展》杂志是由中华人民共和国新闻出版总署、正式批准公开发行的优秀期刊，微生物学免疫学进展杂志具有正规的双刊号，其中国内统一刊号：CN62-1120/R，国际刊号：ISSN1005-5673。微生物学免疫学进展杂志社由中华人民共和国卫生部主管、主办，本刊为刊。自创刊以来，被公认誉为具有业内影响力的杂志之一。微生物学免疫学进展并获中国优秀期刊奖，现中国期刊网数据库全文收录期刊。
《微生物学免疫学进展》办刊宗旨为推动医学科技进步，交流经验，培养人才，为卫生防疫、临床医学、生物制品研制提供最新科技信息。
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- 杂志名称：微生物学免疫学进展杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华预防医学会 兰州生物制品研究所
- 国际刊号：1005-5673
- 国内刊号：62-1120/R
- 出版周期：
期刊荣誉：中国核心期刊遴选数据库期刊收录：
禽流感病毒H5N1全基因组克隆与分析
王革非；李卫中；张衡；曾俊；陈幼莹；陈小璇；李康生
关键词：流感病毒, H5N1, 克隆, 反向遗传, 序列分析
摘要：为明确广东地区分离的一株禽流感病毒H5N1的遗传背景,建立流感病毒反向遗传的平台.对该株禽流感病毒进行了空斑纯化与组织细胞培养,检测其在MDCK细胞中的增殖特性;利用H5N1病毒通用引物,通过RT-PCR对该病毒全基因组的8条片段进行全长克隆及测序分析;将H5N1的8条全长基因组片段分别插入反向遗传通用载体中,构建禽流感病毒H5N1的感染性克隆.结果表明,该H5N1毒株在MDCK细胞中可不依赖胰酶进行有效增殖与复制,可使MDCK细胞出现典型细胞病变,具有高致病性禽流感病毒的细胞增殖特征.RT-PCR克隆得到该H5N1毒株的PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M和NS八条全长片段,经测序分析确认该毒株的基因序列,其内部编码序列出现多处突变,其中HA连接肽为多个连续碱性氨基酸,表明该毒株可不依赖胰酶进行有效复制,与细胞培养结果一致,未出现抗药性的遗传突变.PCR与测序证明,插入H5N1八个全长基因组片段的载体序列完全正确,表明成功构建了该毒株的感染性克隆.为明确病毒遗传信息,建立流感病毒反向遗传的平台,为进一步研究禽流感病毒相关疫苗提供了研究基础.
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